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故事接着上一部继续，格鲁决定放弃犯罪，开始做一个负责任的好父亲，并且把自己的地下基地改造成了一个制作果冻和果酱的工厂（当然，他们做的果冻和果酱都很难吃）。
与此同时，反恶人联盟正在调查一起北极圈内的秘密基地被盗的案件，其中一种叫做PX-41的血清被窃取了，这种血清可以让任何生物变成疯狂的杀手。反恶人联盟决定让格鲁加入他们的行动，因为他们认为格鲁还有犯罪的头脑。特工瓦尔特·露西（Wilde Lucy）主动和格鲁组成了搭档，两人之间也擦出了火花……几天后，格鲁的助手尼法东奥博士因为不甘心就此收手，所以背叛了格鲁，去和另一个犯罪分子合作了。
他们在天堂商城进行卧底调查时，格鲁发现了莎莎餐厅（Salsa）的老板爱德华多·贝瑞兹和他以前的犯罪竞争对手——猛爷（El Macho)长得很像，但是……猛爷在20年前已经死了，他是在一场自杀式的惊险表演中牺牲的，这到底是怎么回事……
格鲁后来在秃鹰美发店里发现了一瓶可能是被盗的血清样本。美发店的老板被反恶人联盟逮捕了，但是格鲁觉得事情没那么简单。这件事结束后，特工露西要被调到澳大利亚分局去，但是她已经对格鲁有了感情……
几天后，除了雷克斯（Lex）（一个小黄人）和几个小黄人没有消失外，其他的小黄人都不见了，而且都被注射了上文提到的血清，变成了不会思考的杀人机器……
随着调查的深入，格鲁对那个老板的怀疑越来越强，直到他跟踪他进入了他的秘密基地，他才揭开了真相：老板就是猛爷，他并没有死，而是伪造了自己的死亡，他就是北极圈内的秘密基地的主人，他就是盗走血清的罪魁祸首，他就是尼法东奥博士的新合作伙伴，他就是把小黄人变成杀人机器的幕后黑手。猛爷还不知道格鲁已经改邪归正，所以他还想拉拢格鲁，格鲁借口他的小女儿在找他，就回到了自己的家。
露西因为太想念格鲁，导致她在飞机上看到的每个人都像格鲁，她最后决定还是和格鲁继续合作。露西在格鲁离开那个五月五狂欢的地方几分钟后，露西错过了格鲁，却遇到了猛爷。猛爷的鸡（他的宠物）发现了露西，并且在他的百变钱包里找到了露西的反恶人联盟的证件，也知道了格鲁已经不再是犯罪分子了，并且把露西绑架了！
格鲁回到家后，尼法东奥博士告诉了他露西被绑架的事。尼法东奥博士之后也悄悄地回到格鲁的秘密基地，并把血清的解药放在果冻和果酱里。
拯救行动开始。格鲁假装被那些杀人机器（杀人机器指小黄人被注射了血清后变成的小紫人。那两个假装抓住格鲁的“小紫人”其实也是幸存的小黄人伪装的）抓走，但是其中一个小黄人不小心把脸上的颜料擦掉了，也被那些小紫人识破了。危急时刻，尼法东奥博士出现了，用第一部中的那架飞机把变异的小紫人变回小黄人。格鲁拿着尼法东奥博士改造的果冻枪，把一些小紫人变回了小黄人。猛爷在和格鲁的最后一战中败下阵来后，拿出了一个遥控器。从喷泉里冒出一个导弹，导弹上绑满了炸弹，露西也被绑在导弹上。
猛爷按下发射按钮前，一个小黄豆模仿泰山，把遥控器抢走了。但是在用绳子荡的过程中，他撞到了墙，遥控器也飞了出去。
猛爷注射了血清，但最终也被打败了。猛爷的鸡（他的宠物）按下了按钮。火箭飞了出去，格鲁和露西在危急的时刻跳下了火箭。
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